摘要
本法系在可見異物檢查符合規(guī)定后，用以檢查靜脈用注射劑（溶液型注射液、注射用無菌粉末、注射用濃溶液）及供靜脈注射用無菌原料藥中不溶性微粒的大
小及數(shù)量。
內(nèi)容
本法系在可見異物檢查符合規(guī)定后，用以檢查靜脈用注射劑（溶液型注射液、注射用無菌粉末、注射用濃溶液）及供靜脈注射用無菌原料藥中不溶性微粒的大小及數(shù)量。
本法包括光阻法和顯微計(jì)數(shù)法。當(dāng)光阻法測(cè)定結(jié)果不符合規(guī)定或供試品不適于用光阻法測(cè)定時(shí)，應(yīng)采用顯微計(jì)數(shù)法進(jìn)行測(cè)定，并以顯微計(jì)數(shù)法的測(cè)定結(jié)果作為判定依據(jù)。
光阻法不適用于黏度過高和易析出結(jié)晶的制劑，也不適用于進(jìn)入傳感器時(shí)容易產(chǎn)生氣泡的注射劑。對(duì)于黏度過高，采用兩種方法都無法直接測(cè)定的注射液，可用適宜的溶劑經(jīng)適當(dāng)稀釋后測(cè)定。
試驗(yàn)環(huán)境及檢測(cè) 試驗(yàn)操作環(huán)境應(yīng)不得引入外來微粒，測(cè)定前的操作應(yīng)在層流凈化臺(tái)中進(jìn)行。玻璃儀器和其他所需的用品均應(yīng)潔凈、無微粒。本法所用微粒檢查用水（或其他適宜溶劑），使用前須經(jīng)不大于1.0μm 的微孔濾膜濾過。
取微粒檢查用水（或其他適宜溶劑）50ml，按相應(yīng)檢查法項(xiàng)下規(guī)定的方法測(cè)定。光阻法要求每10ml 中含10μm 以上的不溶性微粒應(yīng)在10 粒以下，含25μm 以上的不溶性微粒應(yīng)在2 粒以下。顯微計(jì)數(shù)法要求每50ml 中含10μm 以上的不溶性微粒應(yīng)在20 粒以下，含25μm 以上的不溶性微粒應(yīng)在5 粒以下。否則表明微粒檢查用水（或其他適宜溶劑）、玻璃儀器或試驗(yàn)環(huán)境不適于進(jìn)行微粒檢查，應(yīng)重新處理，檢測(cè)符合規(guī)定后方可進(jìn)行供試品檢查。
一、光阻法
當(dāng)液體中的微粒通過一窄小的檢測(cè)區(qū)時(shí)，與液體流向垂直的入射光，由于被微粒阻擋而減弱，因此由傳感器輸出的信號(hào)降低，這種信號(hào)變化與微粒的截面積大小相關(guān)，光阻法檢查注射劑中不溶性微粒即依據(jù)此原理。
對(duì)儀器的一般要求 儀器通常包括取樣器、傳感器和數(shù)據(jù)處理器三部分。
測(cè)量粒徑范圍為 2～50μm，檢測(cè)微粒濃度為0～5000 個(gè)/ml。
儀器的校正與檢定 所用儀器應(yīng)至少每 6 個(gè)月校正一次。
（1）取樣體積待儀器穩(wěn)定后，取多于取樣體積的微粒檢查用水置于取樣杯中，稱定重量，通過取樣器由取樣杯中量取一定體積的微粒檢查用水后，再次稱定重量。以兩次稱定的重量之差計(jì)算取樣體積。連續(xù)測(cè)定3 次，每次測(cè)得體積與量取體積的示值之差應(yīng)在±5%以內(nèi)。測(cè)定體積的平均值與量取體積的示值之差應(yīng)在±3%以內(nèi)。也可采用其他適宜的方法校正，結(jié)果應(yīng)符合上述規(guī)定。
（2）微粒計(jì)數(shù)取相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不大于 5%，平均粒徑為10μm 的標(biāo)準(zhǔn)粒子，制成每1ml 中含1000～1500 微粒數(shù)的懸浮液，靜置2 分鐘脫氣，開啟攪拌器，緩慢攪拌使其均勻（避免氣泡產(chǎn)生），依法測(cè)定3 次，記錄5μm 通道的累計(jì)計(jì)數(shù)，第一次數(shù)據(jù)不計(jì)，后兩次測(cè)定結(jié)果的平均值與已知粒子數(shù)之差應(yīng)在±20%以內(nèi)。
（3）傳感器分辨率取相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不大于 5%，平均粒徑為10μm 的標(biāo)準(zhǔn)粒子（均值粒徑的標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于1μm），制成每1ml 中含1000～1500 微粒數(shù)的懸浮液，靜置2 分鐘脫氣，開啟攪拌器，緩慢攪拌使其均勻（避免氣泡產(chǎn)生），依法測(cè)定8μm、10μm 和12μm 三個(gè)通道的粒子數(shù)，計(jì)算8μm 與10μm 兩個(gè)通道的差值計(jì)數(shù)和10μm 與12μm 兩個(gè)通道的差值計(jì)數(shù)，上述兩個(gè)差值計(jì)數(shù)與10μm 通道的累計(jì)計(jì)數(shù)之比都不得小于68%。若校正結(jié)果不符合規(guī)定，應(yīng)重新調(diào)試儀器后再次進(jìn)行校正，符合規(guī)定后方可使用。
注：如所使用儀器附有自檢軟件，可進(jìn)行自檢。
檢查法
（1）標(biāo)示裝量為25ml 或25ml 以上的靜脈用注射液或注射用濃溶液除另有規(guī)定外，取供試品，用水將容器外壁洗凈，小心翻轉(zhuǎn)20 次，使溶液混合均勻，立即小心開啟容器，先倒出部分供試品溶液沖洗開啟口及取樣杯，再將供試品溶液倒入取樣中，靜置2 分鐘或適當(dāng)時(shí)間脫氣，置于取樣器上（或?qū)⒐┰嚻啡萜髦苯又糜谌悠魃希?。開啟攪拌或以手緩緩轉(zhuǎn)動(dòng)，使溶液混（避免氣泡產(chǎn)生），依法測(cè)定至少3 次，每次取樣應(yīng)不少于5ml，記錄數(shù)據(jù)；另取至少2 個(gè)供試品，同法測(cè)定。每個(gè)供試品第一次數(shù)據(jù)不計(jì)，取后續(xù)測(cè)定結(jié)果的平均值計(jì)算。
（2）標(biāo)示裝量為25ml 以下的靜脈用注射液或注射用濃溶液除另有規(guī)定外，取供試品，用水將容器外壁洗凈，小心翻轉(zhuǎn)20 次，使溶液混合均勻，靜置2 分鐘或適當(dāng)時(shí)間脫氣，小心開啟容器，直接將供試品容器置于取樣器上，開啟攪拌或以手緩緩轉(zhuǎn)動(dòng)，使溶液混勻（避免產(chǎn)生氣泡），由儀器直接抽取適量溶液（以不吸入氣泡為限），測(cè)定并記錄數(shù)據(jù)；另取至少3 個(gè)供試品，同法測(cè)定。第一個(gè)供試品的數(shù)據(jù)不計(jì)，取后續(xù)測(cè)定結(jié)果的平均值計(jì)算。
（1）、（2）項(xiàng)下的注射用濃溶液如黏度太大，不便直接測(cè)定時(shí)，可經(jīng)適當(dāng)稀釋，依法測(cè)定。
也可采用適宜的方法，在層流凈化臺(tái)上小心合并至少 3 個(gè)供試品的內(nèi)容物（使總體積不少于25ml），置于取樣杯中，靜置2 分鐘或適當(dāng)時(shí)間脫氣，置于取樣器上。開啟攪拌或以手緩緩轉(zhuǎn)動(dòng)，使溶液混勻（避免氣泡產(chǎn)生），依法測(cè)定至少4 次，每次取樣應(yīng)不少于5ml。第一次數(shù)據(jù)不計(jì)，取后續(xù)測(cè)定結(jié)果的平均值，根據(jù)取樣體積與每個(gè)容器的標(biāo)示裝量體積，計(jì)算每個(gè)容器所含的微粒數(shù)。
（3）靜脈注射用無菌粉末除另有規(guī)定外，取供試品，用水將容器外壁洗凈，小心開啟瓶蓋，精密加入適量微粒檢查用（或適宜的溶劑），小心蓋上瓶蓋，緩緩振搖使內(nèi)容物溶解，靜置2 分鐘或適當(dāng)時(shí)間脫氣，小心開啟容器，直接將供試品容器置于取樣器上，開啟攪拌或以手緩緩轉(zhuǎn)動(dòng)，使溶液混勻（避免氣泡產(chǎn)生），由儀器直接抽取適量溶液（以不吸入氣泡為限），測(cè)定并記錄數(shù)據(jù)；另取至少3 個(gè)供試品，同法測(cè)定。第一個(gè)供試品的數(shù)據(jù)不計(jì)，取后續(xù)測(cè)定結(jié)果的平均值計(jì)算。
也可采用適宜的方法，取至少3 個(gè)供試品，在凈化臺(tái)上用水將容器外壁洗凈，小心開啟瓶蓋，分別精密加入適量微粒檢查用水（或適宜的溶劑），緩緩振搖使內(nèi)容物溶解，小心合并容器中的溶液（使總體積不少于25ml），置于取樣杯中，靜置2 分鐘或適當(dāng)時(shí)間脫氣，置于取樣器上。開啟攪拌或以手緩緩轉(zhuǎn)動(dòng)，使溶液混勻（避免氣泡產(chǎn)生），依法測(cè)定至少4 次，每次取樣應(yīng)不少于5ml。第一次數(shù)據(jù)不計(jì)，取后續(xù)測(cè)定結(jié)果的平均值，計(jì)算每個(gè)容器所含的微粒數(shù)。
（4）供注射用無菌原料藥按品種項(xiàng)下規(guī)定，取供試品適量（相當(dāng)于單個(gè)制劑的最大規(guī)格量），置取樣杯或適宜的容器中，照上述（3）法，自“精密加入適量微粒檢查用水（或適宜的溶劑），緩緩振搖使內(nèi)容物溶解……”起，依法操作并測(cè)定。至少取3 份供試品測(cè)定。計(jì)算每份所含的微粒數(shù)。結(jié)果判定
（1）標(biāo)示裝量為100ml 或100ml 以上的靜脈用注射液除另有規(guī)定外，每1ml 中含10μm 以上的微粒不得過25 粒，含25μm 以上的微粒不得過3 粒。
（2）標(biāo)示裝量為100ml 以下的靜脈用注射液、靜脈注射用無菌粉末、注射用濃溶液及供注射用無菌原料除另有規(guī)定外，每個(gè)供試品容器（份）中含 10μm 以上的微粒不得過6000 粒，含25μm 以上的微粒不得過600 粒。
二、顯微計(jì)數(shù)法
對(duì)儀器的一般要求 儀器通常包括層流凈化臺(tái)、顯微鏡、微孔濾膜及其濾器、平皿等。
層流凈化臺(tái) 高效空氣過濾器孔徑 0.45μm，氣流方向由里向外，應(yīng)定期檢查風(fēng)速及凈化臺(tái)上空氣中的微粒數(shù)。
顯微鏡 雙筒大視野顯微鏡，目鏡內(nèi)附標(biāo)定的測(cè)微尺（每格0.05～0.1mm）。坐標(biāo)軸前后、左右移動(dòng)范圍均應(yīng)大于30mm，顯微鏡裝置內(nèi)附有光線投射角度、光強(qiáng)度均可調(diào)節(jié)的照明裝置。檢測(cè)時(shí)放大100 倍。
微孔濾膜 白色，孔徑0.45μm、直徑25mm 或13mm，一面印有間隔3mm的格柵；膜上如有10μm 以上的不溶性微粒，應(yīng)在5 粒以下，并不得有25μm以上的微粒，必要時(shí)，可用微粒檢查用水沖洗使符合要求。
檢查前的準(zhǔn)備 試驗(yàn)環(huán)境檢測(cè)符合規(guī)定后，在層流凈化臺(tái)上將濾器用微粒檢查用水（或其他適宜溶劑）沖洗至潔凈，用平頭無齒鑷子夾取測(cè)定用濾膜，用微粒檢查用水（或其他適宜溶劑）沖洗后，置濾器托架上；固定濾器，倒置，反復(fù)用微粒檢查用水（或其他適宜溶劑）沖洗濾器內(nèi)壁，瀝干后安裝在抽濾瓶上，備用。
檢查法
（1）標(biāo)示裝量為25ml 或25ml 以上的靜脈用注射液或注射用濃溶液除另有規(guī)定外，取供試品，用水將容器外壁洗凈，在層流凈化臺(tái)上小心翻轉(zhuǎn)20 次，使溶液混合均勻，立即小心開啟容器，用適宜的方法抽取或量取供試品溶液25ml，沿濾器內(nèi)壁緩緩注入經(jīng)預(yù)處理的濾器（濾膜直徑25mm）中。靜置1 分鐘，緩緩抽濾至濾膜近干，再用微粒檢查用水25ml，沿濾器內(nèi)壁緩緩注入，洗滌并抽濾至濾膜近干，然后用平頭鑷子將濾膜移置平皿上（必要時(shí)，可涂抹極薄層的甘油使濾膜平整），微啟蓋子使濾膜適當(dāng)干燥后，將平皿閉合，置顯微鏡載物臺(tái)上。調(diào)好入射光，放大100 倍進(jìn)行顯微測(cè)量，調(diào)節(jié)顯微鏡至濾膜格柵清晰，移動(dòng)坐標(biāo)軸，分別測(cè)定有效濾過面積上最長(zhǎng)粒徑大于10μm 和25μm 的微粒數(shù)。另取至少兩個(gè)供試品，同法測(cè)定，計(jì)算測(cè)定結(jié)果的平均值。
（2）標(biāo)示裝量為25ml 以下的靜脈用注射液或注射用濃溶液除另有規(guī)定外，取供試品，用水將容器外壁洗凈，在層流凈化臺(tái)上小心翻轉(zhuǎn)20 次，使混合均勻，立即小心開啟容器，用適宜的方法直接抽取每個(gè)容器中的全部溶液，沿濾器內(nèi)壁緩緩注入經(jīng)預(yù)處理的濾器（濾膜直徑13mm）中，照上述（1）同法測(cè)定。
（3）靜脈注射用無菌粉末及供注射用無菌原料藥除另有規(guī)定外，照光阻法中檢查法的（3）或（4）制備供試品溶液，同上（1）操作測(cè)定。
結(jié)果判定
（1）標(biāo)示裝量為100ml 或100ml 以上的靜脈用注射液除另有規(guī)定外，每1ml 中含10μm 以上的微粒不得過12 粒，含25μm 以上的微粒不得過2 粒。
（2）標(biāo)示裝量為100ml 以下的靜脈用注射液、靜脈注射用無菌粉末、注射用濃溶液及供注射用無菌原料除另有規(guī)定外，每個(gè)供試品容器（份）中含 10μm 以上的微粒不得過3000 粒，含25μm 以上的微粒不得過300 粒。
相關(guān)資料