摘要
液相色譜中,分離效果好壞的一個(gè)重要指針是色譜填料的選擇。
內(nèi)容
1、反向色譜
反向色譜用的填料常是以硅膠為基質(zhì),表面鍵合有極性相對(duì)較弱官能團(tuán)的鍵合相。反向色譜所使用的流動(dòng)相極性較強(qiáng),通常為水、緩沖液與甲醇、乙腈等的混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)的組分最先被沖洗出,而極性較弱的組分在色譜柱上有更強(qiáng)的保留。常用的反向填料有C18、C8、C4等。
2、正相色譜
正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica)以及其它具有極性官能團(tuán),如胺基和氰基的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基或其它極性基團(tuán)極性較強(qiáng),因此,分離的次序是依據(jù)樣品中各組分的極性大小,即極性較弱的組份最先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動(dòng)相極性相對(duì)比固定相低,如正己烷,氯仿,二氯甲烷等。
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