摘要
動態(tài)光散射技術的應用
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動態(tài)光散射技術的應用
溶液中的顆粒物質(如生物大分子、高分子聚合物、膠束等),其顆粒大小的變化往往可以反應出某些性質方面的變化。由于光散射實際上是首先
通過測量大分子物質的擴散系數(shù),進而推導出其它參數(shù)。所以,光散射不僅可以用來進行靜態(tài)測量,還可以檢測一些動態(tài)過程的變化。
下面以大家熟悉的生物學中的幾個具體實例來介紹動態(tài)光散射技術的應用。
1.測定蛋白質分子的均一性
蛋白質樣品的均一性是生長晶體的前提條件,在無法直接觀察蛋白質在溶液中狀態(tài)的情況下,生長晶體是一個需要經(jīng)驗和運氣的過程。但是用光散射技術,只需要幾分鐘就可以確切地告訴你,這個樣品是否有長出晶體的可能性。你還可以測定蛋白在不同溶液中的狀態(tài),從而確定出哪種溶液最適合生長晶體。
2.測定蛋白質分子的pH穩(wěn)定性
有些蛋白質分子在不同的pH值條件下,會有不同的構型,或者形成聚合態(tài),或是變性。如胰島素在pH2.0時是以單體存在,而在pH3.0時則以二聚體形式存在,當pH升至7.0時則以六聚體存在。因為這種變化表現(xiàn)為大小的變化,所以光散射技術可以用來測定蛋白質分子的pH穩(wěn)定性。
3.測定蛋白質分子的熱穩(wěn)定性
對一些熱不穩(wěn)定的蛋白,溫度改變會導致分子變性聚合,因此可以觀察到分子半徑明顯增大。所以可以利用光散射技術來研究蛋白質分子的熱穩(wěn)定性。
4.蛋白質變復性及折疊的研究
蛋白質變性時往往是以聚合形式或較松散的狀態(tài)存在,復性后,蛋白質折疊成天然狀態(tài),會發(fā)生結構的變化,這一變化可以導致流體動力學半徑的變化,所以光散射技術可以用來檢測這一動態(tài)變化的過程。
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