高效液相色譜法的應(yīng)用
高效液相色譜法的應(yīng)用遠(yuǎn)遠(yuǎn)廣于氣相色譜法。它廣泛用于合成化學(xué)、石油化學(xué)、生命科學(xué)、臨床化學(xué)、藥物研究、環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品檢驗(yàn)及法學(xué)檢驗(yàn)等領(lǐng)域。
一. 在食品分析中的應(yīng)用
1.食品營(yíng)養(yǎng)成分分析:蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類、色素、維生素、香料、有機(jī)酸(鄰苯二甲酸、檸檬酸、蘋(píng)果酸等)、有機(jī)胺、礦物質(zhì)等;
2.食品添加劑分析:甜味劑、防腐劑、著色劑(合成色素如檸檬黃、莧菜紅、靛藍(lán)、胭脂紅、日落黃、亮藍(lán)等)、抗氧化劑等;
食品污染物分析:霉菌毒素(黃曲霉毒素、黃桿菌毒素、大腸桿菌毒素等)、微量元素、多環(huán)芳烴等。
二. 在環(huán)境分析中的應(yīng)用
多環(huán)芳烴(特別是稠環(huán)芳烴)、農(nóng)藥(如氨基甲酸脂類,反相色譜)殘留等。
三. 在生命科學(xué)中的應(yīng)用
HPLC技術(shù)目前已成為生物化學(xué)家和醫(yī)學(xué)家在分子水平上研究生命科學(xué)、遺傳工程、臨床化學(xué)、分子生物學(xué)等必不可少的工具。其在生化領(lǐng)域的應(yīng)用主要集中于兩個(gè)方面:
1. 低分子量物質(zhì),如氨基酸、有機(jī)酸、有機(jī)胺、類固醇、卟啉、糖類、維生素等的分離和測(cè)定。
2. 高分子量物質(zhì),如多肽、核糖核酸、蛋白質(zhì)和酶(各種胰島素、激素、細(xì)胞色素、干擾素等)的純化、分離和測(cè)定。
過(guò)去對(duì)這些生物大分子的分離主要依賴于等速電泳、經(jīng)典離子交換色譜等技術(shù),但都有一定的局限性,遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足生物化學(xué)研究的需要。因?yàn)樵谏I(lǐng)域中經(jīng)常要求從復(fù)雜的混合物基質(zhì),如培養(yǎng)基、發(fā)酵液、體液、組織中對(duì)感性趣的物質(zhì)進(jìn)行有效而又特異的分離,通常要求檢測(cè)限達(dá)ng級(jí)或pg級(jí),或pmol,fmol,并要求重復(fù)性好、快速、自動(dòng)檢測(cè);制備分離、回收率高且不失活。在這些方面,HPLC具有明顯的優(yōu)勢(shì)。
四. 在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用
體液中代謝物測(cè)定;藥代動(dòng)力學(xué)研究;臨床藥物監(jiān)測(cè):
1. 合成藥物:抗生素、抗憂郁藥物(冬眠靈、氯丙咪嗪、安定、利眠寧、苯巴比妥等)、黃胺類藥等。
2. 天然藥物生物堿(吲哚堿、顛茄堿、鴉片堿、強(qiáng)心甙)等
五.在無(wú)機(jī)分析中的應(yīng)用
陽(yáng)、陰離子的分析等。