食物中脂肪酸成分的測(cè)定方法

氣相色譜法

此方法測(cè)得的是食物中各種脂肪酸占總脂肪酸的百分比。樣品處理簡(jiǎn)單，快速；方法準(zhǔn)確，靈敏度高。

1.原理

氣相色譜法是利用色譜柱中裝入擔(dān)體及固定液，用載氣把欲分析的混合物帶入色譜柱，在一定的溫度與壓力條件下，各氣體組分在載氣和固定液薄膜的氣液兩相相中的分配系數(shù)不同，隨著載氣的向前流動(dòng)，樣品各組分在氣，液兩相中反復(fù)進(jìn)行分配，使脂肪酸各組分的移動(dòng)速度有快有慢，從而可將各組分分離開(kāi)。然后進(jìn)行分別測(cè)定。

2.適用范圍

此法適用于食物中脂肪酸的分析。

3.儀器

GC9217II氣相色譜儀

氫火焰離子化檢測(cè)器

氮?dú)?、氫氣、壓縮空氣

微處理機(jī)

色譜柱2m×4mm或3m×4mm填充80--100目ChromosorbW，涂以8%或10%（W/W）二乙二醇琥珀酸酯（DEGS）

氣相色譜條件

柱溫:210℃

進(jìn)樣器溫度：280℃

檢測(cè)器溫度：280℃

氮?dú)饬魉伲?0ml/cm2

4.試劑

所有試劑，如未注明規(guī)格，均指優(yōu)級(jí)純，所有實(shí)驗(yàn)用水，均為蒸餾水。

（1）石油醚（沸程30～60℃）分析純

（2）苯

（3）無(wú)水甲醇

（4）0.4mol/L氫氧化鉀--甲醇溶液：稱2.24g氫氧化鉀溶于少許甲醇中，然后用甲醇稀釋到10ml。

（5）脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)（SIGMA）

(6) 脂肪酸混合標(biāo)準(zhǔn)

CHAIN %BYWT

6:0   1.0

8:0   5.0

10:0   4.0

12:0   27.0

14:0   10.0

16:0   10.0

18:0   2.0

18:1   15.0

18:2   25.0

18:3   1.0

5.操作步驟

稱取30--100mg（約2-6滴） 油脂，置入10ml量瓶?jī)?nèi)，加入1-2ml30~60℃沸程石油醚和苯的混合溶劑（1：1），輕輕搖動(dòng)使油脂溶解。加入1-2ml0.4mol/L氫氧化鉀-甲醇溶液，混勻。在室溫靜置5～10分鐘后，加蒸餾水使全部石油醚苯甲酯溶液升至瓶頸上部，放置待澄清。如上清液渾濁而又急待分析時(shí)，可滴入數(shù)滴無(wú)水乙醇，1-2分鐘內(nèi)即可澄清。吸取上清液，在室溫下吹入氮使?jié)饪s，所得到濃縮液即可用于氣層分析。

6.結(jié)果計(jì)算

在有微處理機(jī)的情況下，用歸一化計(jì)算法則可自動(dòng)打印出峰面積和各種脂肪酸占總脂肪酸的百分比。歸一化計(jì)算法不能直接計(jì)算脂肪酸的總重量及各種脂肪酸的實(shí)際含量。

7.注意事項(xiàng)

同一樣品的兩次測(cè)定值之差不得超過(guò)兩次測(cè)定平均值的5%。