摘要
HPLC分析方法開發(fā)中流動(dòng)相的調(diào)整“秘訣”
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HPLC分析方法開發(fā)中流動(dòng)相的調(diào)整“秘訣”
秘訣1:由強(qiáng)到弱: 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進(jìn)行試驗(yàn), 這樣可以很快地得到分離結(jié)果,然后根據(jù)出峰情況調(diào)整有機(jī)溶劑(乙腈或甲醇)的比例。
秘訣2 三倍規(guī)則 :每減少10%的有機(jī)溶劑(甲醇或乙腈)的量,保留因子約增加3倍,此為三倍規(guī)則。這是一個(gè)聰明而又省力的辦法。調(diào)整的過(guò)程中,注意觀察各個(gè)峰的分離情況。
秘訣3 粗調(diào)轉(zhuǎn)微調(diào):當(dāng)分離達(dá)到一定程度,應(yīng)將有機(jī)溶劑10%的改變量調(diào)整為5%,并據(jù)此規(guī)則逐漸降低調(diào)整率,直至各組分的分離情況不再改變。
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