1 儀器組成與開機
1．1本儀器由Class-VP工作站、在線脫線機、輸液泵、自動進樣器、柱溫箱和檢測器等部件組成。各部分的操作均可由工作站或液晶面板控制完成。
1．2分別打計算機、LC-2010A/C高效液相色譜儀的電源開關(guān)。
1．3儀器約需3min時間完成自檢過程，此時雙擊【Class-VP】快捷方式圖標后，雙擊【Instrument l】可進入聯(lián)機狀態(tài)；雙擊【Offline Processing】可進入脫機狀態(tài)（聯(lián)機狀態(tài)下可實現(xiàn)計算機對儀器的操縱控制以及在線據(jù)的采集和分析；脫機狀態(tài)下可實現(xiàn)已采集數(shù)據(jù)的處理和再分析）。
1．4在聯(lián)機狀態(tài)下，計算機屏幕顯示Class-VP 6.12工作站畫面,此時得用工具欄上的【Auto Purge】按鈕對儀器管路進行徹底的沖洗并排除可能存在的氣泡, 【Auto Purge】功能將按照操作者的設(shè)置自動進行和停止(本機為四元低壓梯度系統(tǒng),分為A、B、C、D、R五個流路并配有五路在線脫氣機。其中R流路為自動進樣器的清洗流路。在進行Purge時，可以只選擇所需要的流路進行Purge，但第R路是必選項)。
2 分析方法的建立、存儲和調(diào)用
2．1分析方法的建立
2 .1．1 單擊菜單欄中的【File→Method→New】以便建立一種新方法。
2．1．2 此時【LC Setup Assistant-System】對話框吵將顯示當前的分析方法名為Untitled.met,單擊【Simple Setting】可進行常規(guī)分析條件的設(shè)定；單擊【Method→Instrument Setup】可進行復雜分析條件的設(shè)定。
2．1. 3利用【Simple Setting】進行常規(guī)分析條件的設(shè)定在Mode中選擇Low Prerrure Gradient;在Pump框中設(shè)定流速、各流路(通道)的比例、最大最小大力限;在【Oven】框中設(shè)定柱溫;確?！綝etector A】復選項被選中后，在其中設(shè)定所需的檢測波長；在【Time Program】中設(shè)定液相停止時間以及采集停止時間（一般情況下二者一致?？蛇x擇【LC Stop】時間后，單擊【Apply to All Aequisition Time】按鈕使二者一致）。單擊【Download】按鈕，使所設(shè)定的分析條件成為當前分析方法（每當完成一種新的設(shè)定后，一般均應(yīng)執(zhí)行此步驟，后不贅述）。此時，若儀器的系統(tǒng)控制器沒有打開，可單擊工具欄上的【Instrument On/Off】按鈕，儀器將按照所設(shè)定的條件開始進行。
2．1．4 利用【Method】→【Instrument Setup】進行復雜分析條件的設(shè)定該部分中可對泵、柱溫、檢測器、系統(tǒng)控制器、時間程序等組件或程序進行更進一步的設(shè)定和控制。如：設(shè)定檢測器的靈敏度、D2燈的開關(guān)、梯度洗脫程序的設(shè)定等。
2．1．5 峰/組表（Peak/Group Tables）的設(shè)定
2．1．5．1 打開校準用標準物質(zhì)的色譜文件，點擊積分事件工具欄中的【Define Peaks】按鈕，按狀態(tài)欄的提示進行操作，將要校準的峰（此處即為校準用標準物質(zhì)峰）的保留時間及保留時間窗口添加到峰表中。
2．1．5．2 選擇【Method】→【Peak/Group Tables】打開峰表。在峰表中輸入要校準的峰的相關(guān)信息，其中【ID】、【Ret Time】Window，已自動添加，其他需要輸入的內(nèi)容為：【Name】（組）分峰的名稱）、【ISTD ID#】（內(nèi)標峰的ID號）、【Units】（報告結(jié)果的濃度單位）、【Analysis Channel】（選擇所用的檢測通道）、【Fit Type】（選擇標準曲線的類型，如點到點、線性、二次曲線等方式）、【Zero】（選擇后強制校準曲線通過零點）、【Calib Flag】（選擇Weight Average）、【Level 1~10】（輸入各組分中每份校準用標準用標準物質(zhì)的量及其內(nèi)標物質(zhì)的量），等。
2．2 分析方法的存儲分析方法建立后應(yīng)及時利用菜單欄中的【File→Method→Save(Save As)】或單擊常用工具欄中的保存按鈕進行存儲。分析方法一般建議存儲在C:\Class-VP\Methods中或其他個人文件夾中（無論新建還是調(diào)用一種方法，在對方法本身做了任何的設(shè)定或改動后均應(yīng)隨時點擊常用工具欄中的保存按鈕，以防信息丟失！后不贅述）。
2．3 分析方法的調(diào)用如果想調(diào)用一種已存的分析方法，單擊菜單欄中的【File→Method→Open】后，選中所需的分析方法并單擊“打開”。此時，【LC Setup Assistant-System】對話框中將顯示所打開的分析方法名，其中操作同2.1.
3 供試品分析
3.1 建立或調(diào)用一種分析方法(詳見2). 單擊菜單欄中【File→Method→Open】,選中所需要的分析方法并單擊“打開”, 單擊【Download】按鈕,若儀器的系統(tǒng)控制器沒有打開,可單擊工具欄上的【Instrument ON/OFF】按鈕，此時儀器將按照所選定的分析方法條件開始運行。進樣采集前可以按動工具欄上的【Zero Detector】按鈕將檢測器的基線手動回零（本機具有采集時自動回零功能，此項亦可不做）。
3．2 單次進樣采集分析當色譜柱和檢測器已充分平衡和穩(wěn)定后，單擊【Single Run】按鈕，在出現(xiàn)的對話框中規(guī)定方法文件名（該名稱應(yīng)與您所建立或調(diào)用的方法文件名一致）、數(shù)據(jù)文件存儲路徑（建議存儲在C:\Class-VP\Data\hplc中或其他個人文件夾中）、數(shù)據(jù)文件名、自動進樣器的瓶號（樣品架位號）（如果采用的是140位的樣品架，則樣品架位號為：10001~10070，為左位樣品架1L；20001~20070，為右位樣品架2R、進樣體積(μL)。單擊【Start】,儀器開始單次進樣采集分析，此時出現(xiàn)采集畫面，采集完畢可以進行色譜峰的自動或手動分析。重復上述步驟進行下一次單次進樣采集分析。
3．3 序列（多次）進樣采集分析
3．3．1序列（Sequence）的建立、存儲和調(diào)用
3．3．1．1 序列（Sequence）的建立單擊菜單欄中的【File】→【Sequence】→【New】,出現(xiàn)【New Sequence】對話框，在此規(guī)定方法文件名、數(shù)據(jù)文件存儲路徑、數(shù)據(jù)文件名、自動進樣器的瓶號范圍（開始瓶號和結(jié)束瓶號）、進樣體積、重復進樣次數(shù)等信息（原則同3.2）。單擊【OK】后，出現(xiàn)序列（Sequence）列表，在此可以進行更為詳盡的Sequence編輯。如：【Run Type】（將校準用標準物質(zhì)的首次運行設(shè)定為【Begin Calibration】和【Clear All Calibration】；將校準用標準運行類型均設(shè)為【End Calibration】，則中間的運行自動變?yōu)椤綜alibration】，供試品的運行類型均設(shè)為【Unknown】、【Level】（標準物質(zhì)的Level值應(yīng)與峰表中的Level值相對應(yīng)，依次輸入1~10的水平代碼；供試品的Level值均為0）、【Sample Amount】（校準用標準物質(zhì)的量均輸入1；供試品的量輸入相應(yīng)的具體數(shù)值）、【ISTD Amount】（標準物質(zhì)的內(nèi)標特量均輸入【1】；供試品的內(nèi)標物質(zhì)的量輸入相應(yīng)的具體數(shù)值）。更為詳盡的參數(shù)輸入?yún)⒁娛褂谜f明書。

3．3．1．2 序列（Sequence）的存儲利用菜單欄中的【File】→【Sequence】→【Save(SaveAs)】或單擊常用工具欄中的【保存】按鈕可對當前的序列（Sequence）進行存儲。建議存儲在C:\Class-VP\ Sequence中或其他個人文件夾中。
3．3．1．3 序列（Sequence）的調(diào)用單擊菜單欄中的【File→Sequence→Open】，選擇所需要的Sequence，單擊“打開”。
3．3．2 序列（多次）進樣采集分析首先要建立或調(diào)用一個Sequence并單擊菜單欄中的【File】→【Sequence】→【Open】，將所需要的Sequence打開后，單擊【Sequence Run】按鈕，在【Run Range】中選擇“全部”或“部分”的序列范圍，單擊【Start】，儀器將開始序列（多次）進樣采集分析。
4 分析數(shù)據(jù)的處理和分析報告的打印
4．1 分析數(shù)據(jù)的處理和查看
4．1．1 分析數(shù)據(jù)的處理主要看是積分參數(shù)的設(shè)定。在不設(shè)定任何積分參數(shù)的情況下，儀器將按照缺省參數(shù)值進行積分處理（儀器的缺省積分參數(shù)值為：Width=0.2；Threshold=50）；如果對按照儀器的缺省積分參數(shù)值進行的數(shù)據(jù)處理結(jié)果不滿意，可單擊菜單欄中的【Method→Integration Events】,進行豐富多彩的積分事件的設(shè)置和規(guī)定，設(shè)置后單擊常用工具欄中的【Analyze】按鈕，儀器將按照要求對數(shù)據(jù)文件進行再積分（再處理）。
4．1．2 分析數(shù)據(jù)的查看單擊常用工具欄中的【Report→View→Area%Det(A)】按鈕，可隨時查看數(shù)據(jù)文件的百分面積報告結(jié)果。
4．2 分析報告的打印
4．2．1 數(shù)據(jù)文件的打開單擊菜單欄中【File→Data→Open】,選擇所需要的數(shù)據(jù)文件，單擊【打開】。
4．2．2 分析報告的打印單擊常用工具欄中的【Report→Print→Area%Det(A)】按鈕，可隨時打印數(shù)據(jù)文件的百分面積報告結(jié)果。還可以利用菜單欄中的【Method→Custom→Report】來編輯和打印內(nèi)容更為豐富的用戶報告。
4．3 分析數(shù)據(jù)的存儲（另存）儀器所采集的數(shù)據(jù)文件是自動存儲的，包括對有關(guān)數(shù)據(jù)進行的再積分或再處理。但如果希望原有的數(shù)據(jù)文件不至于被處理后的文件所覆蓋，單擊菜單欄中【File→Data→Save As】或單擊常用工具欄中的【保存】按鈕即可完成相應(yīng)的工作。
5 色譜柱的沖洗
5．1 分析工作結(jié)束后，必須對色譜柱進行充分的沖洗。對于常用的反相色譜柱，一般分別以純水和純甲醇（或乙腈）代替原流動相中的水相（如緩沖溶液）和有機相，按原流動相比例，在1 mL/min的流速下，沖洗60min；再以甲醇為流動相沖洗30min。
5．2 在對色譜柱進行沖洗的過和程中，為延長D2燈的使用壽命，可將其關(guān)閉。方法為
：單擊菜單欄中的【File→Method→Instrument Setup→Detector→Lamp→Off】。
5．3 利用Sequence Run的運行，可實現(xiàn)色譜柱的自動沖洗。方法是在Sequence中的最后一行加入一個事先編好的沖柱方法文件，或利用“Shut Down”的方法將一個事先編好的沖柱方法作為Shut Down文件。
6 關(guān)機
6．1 手動關(guān)機分析工作結(jié)束，并且色譜柱已充分沖洗完畢后，依次單擊工具欄中的【Turn Pumps On/Off】、【Instrument On/Off】按鈕，依次關(guān)閉畫面中的各個Windows界面并退出Class-VP工作站軟件；依次關(guān)閉儀器、計算機的電源開關(guān)。
6．2 自動關(guān)機本機可以實現(xiàn)無人自動關(guān)機。點擊【Shut Down】按鈕后出現(xiàn)Shut Down條件對話框，在其中選擇Shut Down文件（應(yīng)選擇色譜柱沖洗文件作為Shut Down文件），在【Cool Down Time】中規(guī)定一個時間，該時間應(yīng)與沖柱文件的時間相一致，然后分別規(guī)定所要關(guān)閉的組件名稱，單擊【Run】按鈕即可。
7 注意事項
7．1 2010 A和2010 C兩種型號的惟一區(qū)別在于2010 C的自動進樣器樣品架帶有制冷功能，冷卻溫度的設(shè)定在【File→Autosampler→Configuration】中，最低溫度為4℃。
7．2 可利用【File→Method→Print】打印出已打開的方法文件，但其中并不包括2010 C自動進樣器的溫度，可以在【Method→Properties】中進行標明。
7．3 本機及其使用的工作站軟件具有豐富的功能，例如：右鍵菜單、鼠標的單雙擊等不同操作方式會產(chǎn)生不同的功能和效應(yīng)，具體可參閱有關(guān)使用說明書。