一)、開機： 1、打開計算機,進入Windows NT （或Windows 2000）畫面,并運行Bootp Server程序。
2、打開 1100 LC 各模塊電源。
3、待各模塊自檢完成后，雙擊Instrument 1 Online圖標，化學(xué)工作站自動與1100LC
通訊，進入的工作站畫面如下所示。
4、從“View”菜單中選擇“Method and Run control”畫面, 單擊”View”菜單中的“Show Top Toolbar”，“Show status toolbar”，“System diagram”,”Sampling diagram”，使其命令前有“√”標志，來調(diào)用所需的界面。
5、把流動相放入溶劑瓶中。
6、打開Purge閥。
7、單擊Pump圖標，出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定菜單，單擊Setup pump選項，進入泵編輯畫面。
8 、設(shè)Flow：5ml/min，單擊OK。
9、單擊Pump圖標，出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定菜單，單擊Pump control選項，選中On，單擊OK，則系統(tǒng)開始Purge，直到管線內(nèi)（由溶劑瓶到泵入口）無氣泡為止,切換通道繼續(xù)Purge，直到所有要用通道無氣泡為止。
10、單擊Pump圖標，出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定菜單，單擊Pump Control選項，選中Off，單擊Ok關(guān)泵， 關(guān)閉
Purge valve。
11、單擊Pump圖標，出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定菜單，單擊Setup pump選項，進入Pump編輯畫面，設(shè)Flow：1.0ml/min。
12、單擊泵下面的瓶圖標，如圖所示（以二元泵為例），輸入溶劑的實際體積和瓶體積。也可輸入停泵的體積。單擊O（二）數(shù)據(jù)采集方法編輯：
1、開始編輯完整方法：
● 從“Method”菜單中選擇“Edit entire method” 項，如上圖所示選中除“Data analysis ”外的三項，單擊Ok，進入下一畫面。
2、方法信息：
● 在“Method Comments”中加入方法的信息（如：方法的用途等）。
● 單擊Ok 進入下一畫面。
3、泵參數(shù)設(shè)定：（以二元泵為例）
● 在“Flow”處輸入流量,如1ml/min，在“Solvent B”處輸入70.0,(A=100-B) ,也可Insert 一行”Timetable” ,編輯梯度。在“Pressure Limits Max”處輸入柱子的最大耐高壓，以保護柱子。
● 單擊Ok進入下一畫面。
4、自動進樣器參數(shù)設(shè)定:
● 選擇合適的進樣方式, 如圖所示，進樣體積 1.0ul ,洗瓶位置為6號?！癝tandard Injection”----只能輸入進樣體積，此方式無洗針功能?！癐njection with Needle Wash”----可以輸入進樣體積和洗瓶位置，此方式針從樣品瓶抽完樣品后，會在洗瓶中洗針?！癠se injector program”---可以點擊Edit 鍵進行進樣程序編輯。
● 點擊Ok進入下一畫面。
5、柱溫箱參數(shù)設(shè)定:
● 在”Temperature”下面的方框內(nèi)輸入所需溫度,并選中它,點擊”more>>” 鍵,如圖所示,選中”Same as left”---使柱溫箱的溫度左右一致。
● 點擊ok進入下一畫面。
6、VWD檢測器參數(shù)設(shè)定:
● 在”Wavelength”下方的空白處輸入所需的檢測波長,如254nm, 在”Peak width (Response time)”下方點擊下拉式三角框,選擇合適的響應(yīng)時間, 如>0.1min (2s)。
● 在Timetable 中可以“Insert”一行，輸入隨時間切換的波長，如1min ，波長=300nm。點擊ok進入下一畫面。
7、DAD檢測器參數(shù)設(shè)定:
● 檢測波長: 254nm,BW=30nm, 參比波長=350nm,BW=100nm;
● 檢測波長：一般選擇最大吸收處的波長。樣品帶寬BW： 一般選擇最大吸收值一半處的整個寬度。參比波長：一般選擇在靠近樣品信號的無吸收或低吸收區(qū)域。參比帶寬BW：至少要與樣品信號的帶寬相等，許多情況下用100nm作為缺省值。Peak width（Response time）：其值盡可能接近要測的窄峰峰寬。Slit—狹縫窄，光譜分辨率高；寬時，噪音低。同時可以輸入采集光譜方式，步長，范圍，閾值。選中所用的燈。
● 點擊Ok進入下一畫面。
8、 RID檢測器參數(shù)設(shè)定:
● 色譜條件:
進樣體積: 20ul 。 光學(xué)單元溫度: Off 。
極性: 正 。 峰寬(響應(yīng)時間) : 4s 。
● 如圖所示: “Optical Unit Temperature”---若環(huán)境溫度控制在±2℃,設(shè)定為Off, 若環(huán)境溫度不穩(wěn)定,則設(shè)定光學(xué)單元溫度為高于環(huán)境溫度5度,以防樣品在池中沉淀。“Peak width”---大多數(shù)分析設(shè)為4S，只有在高速分析下設(shè)為更短?！癆utomatic recycling after analysis”---在不進行分析時可以讓流動相循環(huán)，節(jié)省流動相，檢測器連續(xù)運行，可隨時投入使用。
● ***** 點擊RID圖標，選擇RID Control ：Heater 設(shè)為On，若要循環(huán)流動相，必須將“Recycling Valve”設(shè)為ON。手動purge 參比池，將其設(shè)為On，并輸入Purge 時間。
9、 FLD檢測器參數(shù)設(shè)定:
色譜條件：
● 樣品：P/N 01018-68704 用甲醇稀釋為1:10。
● 進樣體積：5ul。
● 柱溫箱: 30℃ 。 EX=246nm, EM=317nm ,PMT=10。
● 響應(yīng)時間=4s. 停止時間： 出峰完畢。
● Excitation A: 激發(fā)波長:200-700nm,步長為1nm,或Zero Order。
● Emission: 發(fā)射波長: 280-900nm, 步長為1nm,或Zero Order。
● PMT: 大多數(shù)應(yīng)用適當?shù)脑O(shè)定值為10,若高濃度樣品峰被切平頭,則減少 PMT 值。
● “Peak width”：大多數(shù)應(yīng)用設(shè)為4s，只有快速分析采用小的設(shè)定值。
● Multi Ex ： 多波長及光譜（激發(fā)）。
● Multi Em：多波長及光譜（發(fā)射）。
● 同時可以輸入范圍Range、步長step、采集光譜。
10、 在“ Run time checklist ”中選中“Data acquisition”，單擊Ok。
11、 單擊“Method”菜單，選中“Save method as”，輸入一方法名，如“test”，單擊Ok。
12、 從菜單 “View”中選中”O(jiān)nline signal” ,選中Windows 1,然后單擊Change 鈕,將所要繪圖的信號移到右邊的框中,點擊Ok.(如同時檢測二個信號,則重復(fù)12,選中
Windows 2)。
13、 從“Run control ”菜單中選擇“Sample info”選項，如上圖所示，輸入操作者名稱，在“Data file ”中選擇“Manual”或“Prefix”。
區(qū)別: Manual--每次做樣之前必須給出新名字,否則儀器會將上次的數(shù)據(jù)覆蓋掉。 Prefix—在Prefix 框中輸入前綴，在Counter 框中輸入計數(shù)器的起始位，儀器會自動命名，如vwd0001，vwd0002……。
14、 從Instrument 菜單選擇System on。
15、 等儀器Ready，基線平穩(wěn)，從Method菜單中選擇“Run method”，進樣。
（DAD, VWD色譜圖如下所示：）
（三）、數(shù)據(jù)分析方法編輯:
1、 從“View”菜單中，單擊“Data analysis”進入數(shù)據(jù)分析畫面。
2、 從“File”菜單選擇“Load signal”，選中您的數(shù)據(jù)文件名，如下圖所示。單擊Ok。
3、 做譜圖優(yōu)化,從“Graphics”菜單中選擇“Signal options”選項，。從Ranges中選擇Auto scale及合適的顯示時間，單擊ok,或選擇”Use Ranges” 調(diào)整。反復(fù)進行，直到圖的比例合適為止。
4、積分:
(1)、從“Integration”中選擇 “Auto integrate”,如積分結(jié)果不理想,再從菜單中選擇“Integration Events”選項，選擇合適的Slope sensitivity，Peak width，Area reject，Height reject。
(2)、從“Integration”菜單中選擇“Integrate”選項， 則數(shù)據(jù)被積分。
(3)、如積分結(jié)果不理想，則修改相應(yīng)的積分參數(shù)，直到滿意為止。
(4)、單擊左邊“√”圖標，將積分參數(shù)存入方法。
5、打印報告:
(1)、從“Report”菜單中選擇“Specify report”選項，進入如上畫面。
(2)、單擊“Quantitative Results”框中Calculate右側(cè)的黑三角，選中Percent（面積百分比），其它選項不變。
(3)、單擊Ok.
(4)、從“Report”菜單中選擇“Print report”，則報告結(jié)果將打印到屏幕上，如想輸出到打印機上，則單擊Report 底部的“Print”鈕。
(四)、關(guān)機:
● 關(guān)機前，用 100%的水沖洗系統(tǒng)20分鐘，然后用有機溶劑沖洗系統(tǒng)10分鐘（如ACN），然后關(guān)泵，（適于反相色譜柱）。[正相色譜柱用適當?shù)娜軇_洗]
● 退出化學(xué)工作站，及其它窗口，關(guān)閉計算機（用shut down關(guān)）。
● 關(guān)掉Agilent 1100電源開關(guān)。