影響色譜柱使用壽命的因素及解決方法
在以水溶液為活動相時,水溶液中的微生物例如細菌輕易生長,當用水溶液或有機酸緩沖液保護柱子時,一些霉菌可能在色譜柱中滋生,堵塞固定相顆粒間的空隙。由于濕法填充技術(shù)的問世,目前普遍使用的色譜柱填料直徑一般都小于10um,活動相中的顆粒雜質(zhì)很輕易先沉積在柱頭然后慢慢堵塞柱子。活動相的pH值對色譜柱也有影響,特別是對化學鍵合硅膠填料,水溶液的pH最適范圍在2~7.5之間,當pH>8時,硅膠會釋出天生絮狀物堵塞柱子,且難以復原,柱效很快降低,甚至完全失效。當在緩沖液中加進有機溶劑例如甲醇或乙腈時,鹽類的溶解度下降,會析出鹽沉淀,堵塞柱子。同時活動相中的有機溶劑和鹽會腐蝕色譜柱頭的篩板,產(chǎn)生柱頭凹陷?；顒酉嗟臉O性對柱子也有一定影響,對于硅膠柱,甲醇、水、冰乙酸等極性較大物質(zhì)會破壞填料,反之,對于化學鍵合硅膠,極性小的物質(zhì)如正丁醇、二氯甲烷等也起同樣的作用。堿性溶液會破壞陽離子交換樹脂色譜柱,而酸性溶液輕易損壞陰離子交換樹脂柱。